乳源六肽預(yù)防和降低小鼠急性酒精性肝損傷及其機(jī)制

摘要：目的研究乳源六肽(PGPIPN)在降低小鼠酒精性肝損傷方面的作用及其機(jī)制。方法建立小鼠急性酒精肝損傷的動(dòng)物模型,健康雄性昆明種小鼠60只,體質(zhì)量18~22 g,動(dòng)物預(yù)飼養(yǎng)1周后分成6組:對(duì)照組、模型組、PGPIPN L組、PGPIPN M組、PGPIPN H組和谷胱甘肽(GSH)組,每組10只小鼠。為了制作小鼠急性酒精性肝損傷的動(dòng)物模型,實(shí)驗(yàn)最后3 d,PGPIPN低、中、高劑量組、GSH組和模型對(duì)照組以56°紅星二鍋頭酒灌胃,對(duì)照組使用等量蒸餾水灌胃,建立小鼠的急性酒精性肝損傷的對(duì)照模型。12 h后,將小鼠頸椎脫臼處死,取材檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),將小鼠稱(chēng)重并麻醉,收集血清和肝臟樣品,取肝臟稱(chēng)重后保存,計(jì)算出肝臟指數(shù)。同時(shí),測(cè)定小鼠血清中天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)含量,血清和肝勻漿中三酰甘油(TG)和總膽固醇(TC)的含量。取肝臟組織制作成病理切片,觀察肝臟細(xì)胞的病理學(xué)變化。原代細(xì)胞培養(yǎng),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)肝臟組織的凋亡狀況。結(jié)果生化分析顯示模型組小鼠血清TG、TC和肝臟TG(肝勻漿中TG的濃度)高于對(duì)照組,PGPIPN H劑量組、PGPIPN M劑量組和PGPIPN L劑量組血清中ALT、AST含量與模型組相比降低,PGPIPN高劑量組中TNF-α含量較模型組也有減少。對(duì)照組中,肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,凋亡指數(shù)為3.61%。而模型組中肝索結(jié)構(gòu)紊亂,液泡數(shù)目增加,肝臟細(xì)胞的邊界不清晰,細(xì)胞核消失,細(xì)胞皺縮,凋亡指數(shù)為36.87%,出現(xiàn)了明顯的細(xì)胞凋亡狀態(tài)。PGPIPN L組細(xì)胞出現(xiàn)凋亡狀態(tài),而PGPIPN H組細(xì)胞狀態(tài)良好,無(wú)凋亡現(xiàn)象發(fā)生。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,對(duì)照組為4.558%,模型組為31.50%。結(jié)論P(yáng)GPIPN能夠預(yù)防和降低小鼠急性酒精性肝損傷。