基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜技術直接鑒定尿路感染病原菌

摘要：目的利用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜技術(MALDI-TOFMS)建立尿路感染病原菌快速、準確的鑒定方法。方法收集2017年6月至2018年11月武漢大學人民醫院中段尿培養標本4493例,采用差速離心法富集細菌,利用MALDI-TOFMS對富集后的菌液進行快速鑒定,并與傳統培養1~2d后形成的菌落最終鑒定結果進行比較,同時將尿路感染常見病原菌作倍比稀釋評估細菌被鑒定的最低檢測限度。結果4493例中段尿標本中,775例單一菌感染且細菌數≥105cfu/mL的樣本運用MALDI-TOFMS直接檢測出663株菌,尿病原菌直接質譜鑒定率為85.55%(663/775),菌株的屬、種鑒定符合率分別為85.55%(663/775)和83.10%(644/775);其中557株革蘭陰性菌屬、種鑒定符合率分別為94.80%(528/557)和94.08%(524/557),159株革蘭陽性菌屬、種鑒定符合率分別為71.07%(113/159)和64.78%(103/159),59例真菌屬、種鑒定符合率分別為37.29%(22/59)和28.81%(17/59)。183例樣本為2種菌混合感染,采用MALDI-TOFMS直接鑒定出136例樣本中的1種優勢菌,直接質譜鑒定率為74.32%(136/183),同時發現不同濃度的細菌計數與MALDI-TOFMS陽性率有一定的關系,在1.5×104cfu/mL革蘭陰性菌比革蘭陽性菌的質譜鑒定率高。結論當尿液中的細菌濃度達到一定的檢測限度時,MALDI-TOFMS可以直接檢測其細菌,且檢出率高、結果可靠;MALDI-TOFMS對混合菌感染的樣本也有一定鑒定能力,該方法能夠極大地縮短病原菌的鑒定時間,為臨床診斷提供有效、準確、可靠的手段。