肝素及硫酸軟骨素抑制Ⅰ型與Ⅲ型草魚呼腸孤病毒的體外增殖

摘要：草魚(Ctenopharyngodon idellus)是我國一類重要的經濟魚類,約占淡水養殖產量的20%,但每年由于病害原因造成的減產在30%以上。其中草魚呼腸孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)危害最大,被中國農業農村部列為二類動物疫病,開發具有臨床價值的環境友好型藥物或疫苗對草魚出血病的防控具有重要意義。近年來,有大量研究表明肝素分子能抑制多種病毒的感染。為了揭示肝素分子及其類似物是否也可以阻遏GCRV感染,本研究利用Ⅰ、Ⅲ型GCRV分別感染草魚腎細胞CIK,通過real time RT-PCR及Western Blot技術分別揭示GCRV感染后細胞上清中的子代病毒擴增效率及細胞內病毒蛋白合成水平,評價了肝素及其類似物硫酸軟骨素對GCRV感染的抑制效果。結果表明,肝素分子在100μg/mL以上濃度時即對GCRV有抑制效果,10mg/mL以上用量時,病毒蛋白合成效率及上清子代病毒擴增效率均顯著降低;其類似物硫酸軟骨素相比肝素抑制效果有所降低,但在20mg/mL以上用量時,病毒蛋白合成效率及上清子代病毒擴增效率也均有顯著降低。研究結果表明肝素及其類似物對不同基因型的草魚呼腸孤病毒的感染具有廣譜抑制效應。本研究為開發肝素類似物作為拮抗草魚出血病的環境友好型藥物奠定了初步基礎。