輪狀病毒結構蛋白VP4在家蠶桿狀病毒表達系統中的表達

摘要：輪狀病毒(rotavirus,RV)是引起全球嬰幼兒及幼畜非細菌性胃腸炎的主要病原體之一,VP4蛋白是輪狀病毒的主要中和抗原。利用載體RD-BmBacmid與重組載體pBacPAK8-VP4共轉染家蠶細胞BmN獲得重組家蠶桿狀病毒BmNPV-VP4,并用該病毒感染BmN細胞及家蠶5齡幼蟲,從而在BmN細胞及家蠶中表達TB-Chen株輪狀病毒的VP4蛋白。Western blotting檢測到BmN細胞及家蠶幼蟲血淋巴中均出現88 kD的特異性條帶,證明VP4蛋白在BmN細胞和家蠶中獲得了表達。ELISA檢測結果顯示,VP4蛋白在BmN細胞和家蠶幼蟲血淋巴中的表達分別在感染后4 d和6 d達到最高水平,每個細胞和每mL血淋巴中的表達量分別為4.28 pg和1.61μg。研究結果為輪狀病毒口服疫苗的研制奠定了基礎。