轉CmTreⅡ基因水稻RNAi效應的室內和田間抗性及遺傳性鑒定

摘要：本研究采用農桿菌介導的遺傳轉化技術,將CmTreⅡ（膜結合型海藻糖酶基因一個靶位點）導入粳稻中花11號中,利用CmTreⅡ-dsRNA（含有膜結合型海藻糖酶基因一個靶位點的雙鏈RNA）的沉默效應,沉默稻縱卷葉螟的膜結合型海藻糖酶,最終獲得一批抗蟲性較好的轉基因純合株系。研究中進一步檢測了這些株系的室外卷葉率、白葉率以及室內抗蟲性。采用實時熒光定量PCR（RT-q PCR）檢測轉基因水稻室內抗蟲性CmTre2基因的相對表達量。通過RT-PCR技術檢測了轉CmTreⅡ基因水稻的遺傳性。結果顯示：在室外抗蟲性試驗中,稻縱卷葉螟對水稻的取食量明顯下降,轉CmTreⅡ基因水稻的卷葉率和白葉率分別為13.40%和12.47%,相比對照組分別下降了11.32%和10.10%;在室內抗蟲性試驗中,RT-q PCR檢測結果表明,稻縱卷葉螟在取食轉CmTreⅡ基因水稻的96 h后,CmTre2基因的相對表達量比對照組下降了29.00%;7 d后,實驗組的死亡率為56.67%,相比對照組增加了46.67%。在遺傳性試驗中,檢測發現轉CmTreⅡ基因水稻的遺傳性良好。因此本研究成功鑒定了轉CmTreⅡ基因水稻對稻縱卷葉螟的抗蟲性以及遺傳性。