赤芍總苷抑制人肺癌A549細胞增殖、遷移與侵襲的作用機制研究

摘要：目的探究赤芍總苷(total paeony glycoside,TPG)對人肺癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響,并進一步研究其潛在的調控機理。方法以人肺癌A549細胞作為細胞研究模型,分別給予0、50、100、200μg·mL^-1的TPG處理12、24 h,進行時間-劑量效應分析,并選定100μg·mL^-1TPG處理24 h為機制研究模型;采用小干擾RNA(si AKT)干預Akt蛋白表達水平,噻唑藍(MTT)法檢測不同濃度和時間點TPG對人肺癌A549細胞增殖抑制的影響;采用蛋白免疫印跡法(Western Blot)分別檢測Akt、MMP2、p-Akt和MMP9蛋白表達的水平;采用細胞劃痕檢測TPG對人肺癌A549細胞遷移的能力;采用Transwell實驗檢測TPG對A549細胞遷侵襲能力的影響。結果MTT試驗顯示:TPG對A549細胞的生長呈劑量和時間依賴性抑制作用;Western Blot結果顯示:與對照組比較,各處理組隨著TPG劑量遞增,Akt、p-Akt、MMP2和MMP9蛋白表達的水平呈現劑量依賴性下降;細胞劃痕結果顯示:TPG可呈劑量依賴性抑制A549細胞的遷移;Transwell試驗表明:TPG可抑制A549細胞的侵襲。采用si AKT聯合TPG處理,細胞劃痕和Transwell試驗發現:與TPG單獨處理組比較,TPG+si AKT聯合處理抑制A549細胞的遷移和侵襲更顯著。Western Blot檢測發現:與TPG單獨處理組比較,TPG+si AKT聯合處理組Akt、p-Akt、MMP2和MMP9蛋白表達的水平均顯著下降。結論TPG可抑制人肺癌A549細胞的增殖、遷移和侵襲,其分子機制可能是通過抑制Akt通路的激活,進而降低MMP-2和MMP-9蛋白的表達,研究結果為TPG的臨床應用提供了實驗依據。