江蘇省蠶豆上菜豆黃花葉病毒的分子鑒定

摘要：為掌握江蘇省豆類作物上的病毒病種類,本研究于2018年對江蘇省蠶豆作物病毒進行了調查,累計采集田間疑似病樣55份,為明確其中伴隨的病毒種類,我們對田間采集的疑似病樣提取總RNA后進行了分子檢測,結果發現,在用菜豆黃花葉病毒(Bean yellow mosaic virus,BYMV)檢測引物進行RT?PCR擴增時有16份樣品擴增到1條525 bp左右的條帶,與目的片段大小一致,說明其中可能伴隨有菜豆黃花葉病毒的感染。為進一步確定這一結果,我們針對BYMV CP基因設計了引物,以陽性樣品RNA為模板進行RT?PCR,結果發現均擴增到預期大小的目的條帶,對該片段回收、克隆并測定堿基序列,結果發現其CP基因堿基序列全長819 bp,編碼1個由273個氨基酸組成大小約20 800的蛋白質。BLAST分析結果顯示其與BYMV同源性最高(AB439731,99%),表明其屬于BYMV的一個分離物。利用MEGA軟件對其進行系統進化分析,結果發現這些分離物與日本的蠶豆分離物(AB439731)同源性最高,其次是澳大利亞的蠶豆分離物(HG970867)和中國青海的菜豆分離物(9?16)。這些結果表明江蘇蠶豆上檢測到的病毒是菜豆黃花葉病毒的一個分離物,這是該病毒在江蘇侵染蠶豆的首次分子鑒定報道。