多肽eSN50通過核質轉運受體Importinα抑制HepG2細胞核因子-κB及其下游因子的表達

摘要：目的研究乙醇、內毒素是否通過核轉錄因子NF—kappaB即IKB—NF-κB-importina途徑引起細胞炎癥、凋亡和誘導下游基因TNF-α、Caspase-3的表達；cSN50作為一種穿膜多肽通過阻斷NF-κB與importinct結合，從而抑制NF—KB核轉位及其下游基因的表達，起到保護細胞的作用。方法應用流式細胞儀觀察HepG2經不同濃度乙醇、內毒素刺激后的細胞凋亡率；分光光度計法測Caspase-3活性；ELISA法檢測細胞培養上清TNF-α；Westernblot法檢測NF-KBpso、importina3、IKBa，間接免疫熒光法測p50、IKBα、importinα3的活化水平。結果乙醇、內毒素刺激后TNF-α、Caspase-3的值量效上與空白對照組比差異均有統計學意義（P均〈0．05），細胞核內p50顯著增加（P〈0．05），胞漿IKBa下降（P〈0．05），cSN50（100μmol／L）能部分阻斷P50的核轉位及其下游因子的表達（P〈0．05）。結論急性酒精肝損傷中，NF-κB的核轉位在此損傷中起重要作用，cSN50能部分抑制被刺激后的HepG2細胞核中NF-κB活性及其下游基因的表達。