Vasostatin-1上調(diào)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)HO-1減輕軟脂酸所致炎癥反應(yīng)

摘要：目的研究vasostatin-1(VS-1)對(duì)軟脂酸誘導(dǎo)調(diào)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞所致炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激的影響,并探討其潛在的機(jī)制。方法體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs),用100 nmol/L VS-1預(yù)孵育2 h,Western blot檢測HUVECs中血紅素氧合酶-1(HO-1)的表達(dá),酶學(xué)法測定其活性的變化。隨后檢測VS-1處理前后Nrf2的核轉(zhuǎn)位情況,并采用siRNA沉默其表達(dá)觀察其對(duì)HO-1表達(dá)的影響。在研究VS-1對(duì)軟脂酸所致的炎癥反應(yīng)時(shí),首先以VS-1孵育細(xì)胞2 h,隨后加入100μmol/L軟脂酸作用12 h。ELISA測定IL-6和TNF-α的分泌;熒光探針測定胞內(nèi)活性氧類(ROS)的產(chǎn)生;DNA結(jié)合實(shí)驗(yàn)測定NF-κB活性的變化。結(jié)果100 nmol/L VS-1孵育HUVECs細(xì)胞6 h即可誘導(dǎo)HO-1的表達(dá)并上調(diào)其酶活性,并持續(xù)至18 h。同時(shí),VS-1也能上調(diào)細(xì)胞核內(nèi)Nrf2的水平并增加其DNA結(jié)合活性;采用Nrf2 siRNA沉默其表達(dá)后,HO-1的表達(dá)水平和酶活性顯著下降;軟脂酸處理細(xì)胞后,細(xì)胞核內(nèi)p65水平顯著增高,細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6和TNF-α含量以及胞內(nèi)ROS含量明顯增多,NF-κB的DNA結(jié)合活性也明顯增強(qiáng)。而經(jīng)100 nmol/L VS-1孵育后,NF-κB的活性有所降低,IL-6、TNF-α和ROS含量均有所減少;采用HO-1抑制劑SnPP共同孵育細(xì)胞后,VS-1對(duì)細(xì)胞因子以及ROS的抑制效應(yīng)有所減弱。結(jié)論VS-1上調(diào)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)HO-1,從而減輕軟脂酸所致炎癥反應(yīng)。