豬早期孤雌胚胎脂滴含量和脂肪酸代謝相關(guān)基因表達(dá)的初步研究

摘要：作為能量來源,脂質(zhì)在卵母細(xì)胞成熟、胚胎發(fā)育和干細(xì)胞增殖中發(fā)揮著重要作用,豬卵母細(xì)胞和早期胚胎中存在豐富的脂質(zhì),但是其脂肪酸代謝的作用機(jī)制還知之甚少.本研究通過統(tǒng)計(jì)卵母細(xì)胞的成熟率和體外受精的囊胚率,確定添加10%卵泡液是最優(yōu)的卵母細(xì)胞成熟體系.通過檢測電激活、電激活結(jié)合CB和9%乙醇分別作用3min、8min、11min等對卵裂率和囊胚率的影響,確定電激活(卵裂率為81.69%±0.41%,囊胚率為26.45%±0.28%)方式是最優(yōu)的孤雌激活方案.免疫熒光染色顯示孤雌囊胚的細(xì)胞核數(shù)目明顯少于體外受精囊胚,對孤雌胚胎進(jìn)行脂滴染色和脂滴含量檢測的結(jié)果顯示,脂滴定位于核周圍,H2Av只存在于細(xì)胞核內(nèi),不存在于脂滴中,8-細(xì)胞時(shí)期脂滴直徑達(dá)到最大,而桑椹胚中脂滴含量最高.對脂肪酸代謝相關(guān)基因的RT-PCR結(jié)果顯示,與卵母細(xì)胞相比,FAS等基因表達(dá)量呈在胚胎發(fā)育各個(gè)時(shí)期呈上升趨勢,ACADM等基因表達(dá)量呈下降趨勢.本研究為深入了解脂肪酸代謝在早期胚胎發(fā)育過程中的作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ).