長(zhǎng)江鱘科魚(yú)類尿液成分中L-色氨酸的檢測(cè)分析

摘要：采用高效液相色譜-熒光法(HPLC-FLD)建立了中華鱘和長(zhǎng)江鱘尿液中L-色氨酸的測(cè)定方法。中華鱘和長(zhǎng)江鱘尿液樣品由V(甲醇)∶V(乙腈)=1∶1提取,離心后,上清液經(jīng)ENVI-18固相萃取小柱凈化,利用symmetry@C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5μm)進(jìn)行分離,以乙腈-1%(體積分?jǐn)?shù))甲酸水溶液(10∶90,體積分?jǐn)?shù))為流動(dòng)相等度洗脫,在流速1.0 mL/min,熒光波長(zhǎng)λex=285 nm,λem=353 nm條件下進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示:L-色氨酸標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積與其質(zhì)量濃度在0.010~2.000μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,線性回歸方程為y=247.27x-0.125 5(R2=1)。L-色氨酸的檢出限(LOD)為0.005μg/mL,定量限(LOQ)為0.020μg/mL。L-色氨酸空白加標(biāo)回收率為82.2%~102.1%,樣品基質(zhì)加標(biāo)回收率為85.6%~95.1%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于5.7%。本方法有良好的回收率和精密度,且步驟簡(jiǎn)便,經(jīng)濟(jì)省時(shí),可用于中華鱘和長(zhǎng)江鱘尿液L-色氨酸的檢測(cè),為研究L-色氨酸在瀕危鱘魚(yú)中華鱘和長(zhǎng)江鱘信息交流方面的作用奠定方法學(xué)基礎(chǔ)。