吉陶單極蟲可分泌蛋白酶基因的克隆與生物信息學分析

摘要：粘孢子蟲為魚類主要的寄生蟲,給漁業的生產造成嚴重的危害。近年來,粘孢子蟲的蛋白酶以及抑制劑在入侵和感染宿主中的作用被越來越多的報道。在前期粘孢子蟲吉陶單極蟲轉錄組數據的基礎上,成功克隆了3個可分泌蛋白酶基因:TK Papain-1、TK Papain-2和TK Pepsin,并且通過異源表達得到了與預測蛋白大小相符的蛋白。通過生物信息學的分析發現,TK Papain-1、TK Papain-2屬于Papain (C1A)家族成員,均編碼半胱氨酸蛋白酶,分別編碼150個和322個氨基酸,蛋白大小為17.06 kDa和36.7 kDa;TK Pepsin編碼天冬氨酸蛋白酶,編碼491個氨基酸,編碼蛋白理論大小為55.41 kDa。3個可分泌蛋白酶均有信號肽序列,為可分泌蛋白;通過進化樹的構建,發現與海葵、水螅、纖毛蟲同源序列親緣關系較近。通過多序列比對,找到了可分泌蛋白酶的保守位點。研究結果為進一步深入粘孢子蟲蛋白酶性質及感染機制方面的研究提供了基礎。