人突觸小體相關蛋白25單克隆抗體的制備及初步鑒定

摘要：目的:制備抗人突觸小體相關蛋白25(SNAP25)的鼠源單克隆抗體。方法:利用大腸桿菌表達SNAP25蛋白,純化后免疫BALB/c小鼠制備雜交瘤細胞,篩選針對SNAP25的陽性雜交瘤細胞株,鑒定抗體亞型;用雜交瘤細胞株制備腹水單抗,純化后利用SDS-PAGE檢測抗體純度。結果:表達并純化得到純度大于90%的SNAP25蛋白,免疫小鼠后經2輪篩選得到12株陽性雜交瘤細胞株,其中抗體重鏈包括IgG1、IgG2型,輕鏈大部分為κ鏈;選擇具有相對較高抗原結合活性的14號雜交瘤細胞株制備腹水,純化后得到純度大于90%的抗體。結論:獲得1株高純度的針對SNAP25的鼠源單克隆抗體,為肉毒毒素的檢測奠定了基礎。