N端無(wú)半胱氨酸斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子的構(gòu)建

摘要：在體內(nèi)或體外對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行標(biāo)記或修飾,是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的重要手段之一。目前的蛋白質(zhì)修飾手段存在很多不足之處,尤其會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生影響。為了避免或降低這些影響,借助斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子反式剪接技術(shù)進(jìn)行修飾是一個(gè)有效可行的方法。可是因?yàn)樘烊淮嬖诘臄嗔训鞍踪|(zhì)非常少,使該技術(shù)的應(yīng)用受到了限制。因此通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)篩選、定點(diǎn)突變、WesternBlot等技術(shù)成功獲得了2個(gè)有活性的體內(nèi)斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子和1個(gè)有活性的N端無(wú)半胱氨酸的斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子。為后續(xù)可控的和特異的蛋白N端標(biāo)記及應(yīng)用提供了可行的生物學(xué)工具。