白細胞介素17通過激活p38MAPK信號通路調控人牙周膜成纖維細胞RANKL和OPG的表達

摘要：目的使用p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信號通路抑制劑確定白細胞介素17(IL-17)是否通過該通路參與調控人牙周膜成纖維細胞(HPDLF)核因子κB受體激活蛋白配體(RANKL)和護骨因子(OPG)的表達。方法組織塊法分離培養HPDLF,20 ng/mL IL-17分別刺激0、20、40、60、80 min,Western blot法檢測HPDLF磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白水平。HPDLF隨機分為空白對照組、二甲基亞砜(DMSO)組、p38MAPK抑制劑SB203580組、IL-17組、IL-17聯合DMSO組、IL-17聯合SB203580組。IL-17及聯合處理組,分別添加10μmol/L SB203580、20 ng/mL IL-17。實時定量PCR檢測HPDLF的RANKL、OPG mRNA水平,Western blot法檢測RANKL蛋白水平、ELISA檢測OPG蛋白含量。結果p-p38MAPK蛋白水平在IL-17刺激后的0~60 min內隨時間增加,在60 min時達到最高,在80 min時下降。IL-17可上調HPDLF中RANKL mRNA及蛋白表達,下調OPG mRNA和蛋白表達。較單純使用IL-17刺激,添加SB203580通路抑制劑后,RANKL mRNA和蛋白水平均降低,OPG的mRNA水平升高。結論IL-17通過激活p38MAPK信號通路,上調HPDLF的RANKL表達,抑制OPG mRNA表達。