海生紅藻多管藻中2種R-藻紅蛋白的分離與分析

摘要：本研究以海生紅藻多管藻(Polysiphoniaurceolata)為材料,用DEAESepharoseFastFlow離子交換層析和ButylSepharose4FastFlow疏水作用層析,從SephacryS-300(S-300)凝膠過濾所得R-藻紅蛋白中分離純化出在帶電性和疏水性表現結構特性差異的2種R-藻紅蛋白組分,R-PEI和R-PEII。這2種R-藻紅蛋白在非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native-PAGE)和非變性等電聚焦(nativeisoelectricfocusing,Native-IEF)中均表現單一條帶,等電點(pI)分別為R-PEI4.7,R-PEII4.6。R-PEI和R-PEII有著相同的熒光光譜和400~750nm吸收光譜,僅在波長小于400nm時R-PEI表現出大于R-PEII的紫外光吸收。SDS-PAGE多肽組成分析結果證明,R-PEI和R-PEII不僅有相同的α、β、γ等有色亞基,而且含有相同無色多肽。這些結果表明,R-PEI和R-PEII來自于多肽鏈的結構特性變化,沒有對R-藻紅蛋白各亞基的發色團構象及其微環境產生明顯影響。