基于QuEChERS提取的HPLC-MS/MS法檢測人血漿中6種常用利尿劑

摘要：目的:建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)同時檢測人血漿中6種常用利尿劑氫氯噻嗪、呋塞米、托拉塞米、螺內(nèi)酯、吲達(dá)帕胺和氨苯蝶啶的檢測方法。方法:血漿樣品酶解后,用提取溶劑[乙酸乙酯-乙醚-異丙醇(6∶3∶1)]溶液提取,經(jīng)QuEChERS(分散固相萃取)方法凈化后,以乙腈與水為流動相梯度洗脫,Eclipse Plus C18(3.0 mm×100 mm,1.8μm)色譜柱分離,電噴霧正負(fù)離子同時掃描模式,多級反應(yīng)監(jiān)測(MRM)模式進(jìn)行檢測。結(jié)果:6個化合物質(zhì)量濃度在1.0~250.0μg·L-1范圍內(nèi)呈良好線性,相關(guān)系數(shù)均大于0.996。其中,氫氯噻嗪、托拉塞米、吲達(dá)帕胺和氨苯蝶啶的檢測下限(S/N≥3)為0.30μg·L-1,呋塞米和螺內(nèi)酯為0.5μg·L-1;氫氯噻嗪、托拉塞米、吲達(dá)帕胺和氨苯蝶啶的定量下限(S/N≥10)為1.0μg·L-1,呋塞米和螺內(nèi)酯為2.0μg·L-1,樣品在其定量下限1倍、2倍、10倍3個加標(biāo)水平下回收率在75.2%~90.6%之間,RSD在3.2%~8.1%之間。10名健康成年男性志愿者口服吲達(dá)帕胺2.5 mg后1 h的血藥濃度最高(平均為65.3μg·L-1),隨之急速下降,口服24 h后下降到19.4μg·L-1,96 h時平均濃度為3.2μg·L-1,120 h后所有志愿者血漿檢測均顯示陰性。結(jié)論:該方法靈敏、準(zhǔn)確,操作性強(qiáng),可滿足于血漿樣品中6種常用利尿劑的同時定量檢測分析。