A型肉毒毒素對增生性瘢痕成纖維細胞增殖、凋亡及對ERK／MAPK信號通路的影響

摘要：目的探討A型肉毒毒素對體外培養的人增生性瘢痕成纖維細胞增殖、凋亡及對ERK／MAPK信號通路的影響。方法采用組織塊法將人增生性瘢痕成纖維細胞分離并培養。將其分為對照組及A型肉毒毒素組。A型肉毒毒素組則給予含有0．4U／LA型肉毒毒素的DMEM培養基進行培養。對照組采用單純DMEM培養基培養。在第1、3、5、7天時采用CCK8試劑盒檢測細胞增殖并比較。采用流式細胞術對對照組和A型肉毒毒素干預的成纖維細胞行凋亡檢測。Westernblot法檢測對照組、A型肉毒毒素組及U0126干預組成纖維細胞I型膠原蛋白（collagenI），P—ERKl／2及總ERK蛋白相對表達量。結果A型肉毒毒素能夠顯著抑制成纖維細胞增殖活性，干預7天時，細胞數量僅為對照組的68．9％。A型肉毒毒素組成纖維細胞的凋亡比率為35．9％，顯著高于對照組。三組成纖維細胞的總ERKl／2蛋白相對表達量比較差異無統計學意義（P〉0．05），而P—ERKI／2在對照組則仍顯著高表達，但A型肉毒毒素組和U0126組的P—EKRl／2則顯著受抑制，且低表達。I型膠原蛋白則在對照組中高表達，顯著高于A型肉毒毒素組和U0126組（P〈0．05）。結論A型肉毒毒素能夠通過抑制ERK／MAPK信號通路而使得成纖維細胞凋亡增加，增殖活性減弱，I型膠原蛋白分泌減少。