糖尿病大鼠反復嚴重低血糖后腦內代謝改變的1HNMR波譜研究

摘要：目的運用基于1HNMR的代謝組學方法研究糖尿病大鼠反復嚴重低血糖后腦內代謝的變化，并結合病理學檢查探討糖尿病大鼠反復嚴重低血糖腦損傷的發病機制。方法24只7周齡Sparague Dawley大鼠隨機分為實驗組和對照組，每組12只。實驗組大鼠禁食12h，通過腹腔注射鏈脲佐菌素溶液（65ml／kg）造成糖尿病，此后連續5天每天腹腔注射胰島素（4～8U／kg）誘導嚴重低血糖。對照組則在此期間分別給予等量檸檬酸緩沖液及生理鹽水。每組6只大鼠的海馬和額葉、頂葉、枕葉進行1HNMR波譜檢測，另外6只進行膠質纖維酸性蛋白（GFAP）染色。采用t檢驗進行統計學處理。結果實驗組大鼠誘導低血糖前瓤糖值為12．25±2．64mmol／L，注射胰島素后1h血糖值為1．11±0．45mmol／L，對照組實驗期間血糖值6．88±0．59mmol／L。所有實驗組大鼠在嚴重低血糖期間臨床表現為精神不振、活動度減弱、體溫下降、肢體松軟、皮膚蒼白，4只嚴重者出現抽搐。相比對照組，各腦區乳酸濃度升高、谷氨酰胺下降，同時枕葉丙氨酸和琥珀酸含量下降，額、頂葉還存在膽堿含量下降。GFAP染色顯示，相比對照組，實驗組各腦區的星形膠質細胞數目均顯著性增加（P〈0．05）。結論糖尿病反復嚴重低血糖后腦內代謝改變且存在區域性差異，以能量代謝障礙及谷氨酸一谷氨酰胺循環紊亂為主，糖尿病反復嚴重低血糖后主要引起神經膠質細胞損傷，代謝改變與神經膠質細胞損傷相關。