TBX15基因啟動子甲基化在肝細胞癌中的表達及其功能研究

摘要：目的探討TBX15基因在肝細胞癌中的表達及其啟動子甲基化對細胞生物學行為的影響。方法分別采用亞硫酸氫鹽測序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)和實時熒光定量PCR(qPCR)檢測3種肝癌細胞系(HepG2、MHCC97H、SNU449)中TBX15基因啟動子甲基化狀態和表達水平,再將空白質粒、空載質粒pc3.1和TBX15過表達質粒轉染肝癌SNU499細胞,通過CCK-8實驗和流式細胞術檢測各組肝癌細胞的增殖和凋亡情況。結果 3種肝癌細胞系中,TBX15基因在肝癌SNU449細胞中的啟動子甲基化程度最高,甲基化率為89.5%,而TBX15 mRNA表達水平最低。TBX15過表達質粒組培養48 h后,肝癌SNU449細胞的增殖能力高于空載質粒組,差異有統計學意義(0.549±0.080 vs 0.457±0.506,P=0.015);TBX15過表達質粒組肝癌SNU449細胞的總凋亡比例高于空白質粒組,差異有統計學意義[(5.12±1.42)%vs(2.16±0.41)%,P=0.014]。結論啟動子區異常甲基化可能是肝癌細胞TBX15基因失活的主要原因,且與肝癌惡性生物學行為密切相關。TBX15可能是預測肝癌發生發展的指標。