豬繁殖與呼吸綜合征病毒非結(jié)構(gòu)蛋白2分段真核表達及其細胞定位分析

摘要：為探討非結(jié)構(gòu)蛋白2(non-structural protein 2,NSP2)在豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)復(fù)制過程中的作用及機制,本研究構(gòu)建真核重組質(zhì)粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并瞬時轉(zhuǎn)染至HEK 293T中,同時設(shè)置完整NSP2基因序列重組質(zhì)粒作為對照,轉(zhuǎn)染48 h后分別用不同的抗體進行間接免疫熒光監(jiān)測。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染對照組中細胞核周圍可見特異性熒光,而轉(zhuǎn)染真核重組質(zhì)粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323后,不僅在細胞核周圍,在細胞核內(nèi)也可以觀察到特異性熒光。本研究成功構(gòu)建真核重組質(zhì)粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并可在HEK 293T細胞中正確表達,為進一步研究NSP2在PRRSV復(fù)制過程中的作用提供依據(jù)和基礎(chǔ)。