銅綠假單胞菌噬菌體裂解酶的克隆表達及活性

摘要：為了研究使用酵母表達系統表達重組銅綠假單胞菌噬菌體裂解酶的效果,通過聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)將銅綠假單胞菌噬菌體裂解酶基因ly23克隆至酵母表達載體pSEP1和pSEP1alpha上,并分別轉化至釀酒酵母細胞,對胞內表達及分泌表達重組噬菌體裂解酶LY23的表達水平及裂解活性進行測定。結果表明,用釀酒酵母表達系統分泌表達的LY23粗酶液處理10min后,銅綠假單胞菌菌液的OD620值下降約50%,且比濁法測定顯示LY23對銅綠假單胞菌具有較為顯著且專一的裂解活性。本文研究使用酵母表達系統可分泌表達具備裂解活性的噬菌體裂解酶,可為后期探討其分離純化提供基礎。