條件性敲除軟骨組織中FGF9基因小鼠模型的建立

摘要：目的:利用Cre-LoxP系統建立可調控的軟骨組織條件性敲除成纖維細胞生長因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型。方法:構建針對小鼠Fgf9基因2號外顯子的重組載體,電穿孔轉染胚胎干細胞(ES細胞)。選擇藥物G418和Ganc,篩選陽性ES細胞并進行PCR鑒定。利用顯微注射將ES細胞注入C57BL/6J小鼠囊胚,移入假孕小鼠子宮,獲得含Neo的flox雜合小鼠。該小鼠去Neo后,與ColⅡ-Cre轉基因小鼠雜交,并以他莫昔芬誘導,其后代軟骨細胞內flox純合、Cre陽性小鼠的flox區域被敲除。結果:Fgf9基因flox雜合子小鼠無明顯異常,可穩定繁殖。該flox小鼠與ColⅡ-Cre轉基因小鼠交配后,成功建立條件性敲除軟骨組織中Fgf9基因小鼠模型。結論:利用Cre-LoxP系統,可成功建立Fgf9基因條件性敲除小鼠模型,為后續研究FGF9在骨軟骨發育及骨關節穩態維持中的功能奠定了基礎。