雙重聚合酶鏈式反應快速篩查副溶血性弧菌流行株方法應用與評價

摘要：目的基于種屬特異性tlh基因和典型毒力基因(tdh1_368特異性位點)建立雙重聚合酶鏈式反應(duplex PCR,DPCR)檢測副溶血性弧菌(VP)體系并評價。方法對建立的DPCR檢測體系,用單盲法評估特異性和靈敏度,用人工模擬樣品、腹瀉標本和水產品進行現場方法學評估。結果該法具有高特異性(100%)和靈敏度(≥1.5 ng/μl),用所建立的方法和培養法平行檢測腹瀉標本、市售水產品中的VP,陽性率差異無統計學意義,對VP流行株的正確判斷率為93.5%(29/31);對腹瀉標本24 h內、模擬樣品增菌后4~8 h內檢測并報告VP大流行株。結論DPCR結合常規樣品增菌能加快樣品中VP的檢測和報告,為及時處理疫情提供技術支持。