地龍抗凝血活性體外評價方法的建立

摘要：目的建立一種基于全自動血凝分析儀測定纖維蛋白原-凝血酶時間的地龍及其相關制劑的抗凝血活性的體外評價方法。方法以威廉環毛蚓提取物為研究對象,采用BCA蛋白測定法測定可溶性蛋白含量,以抗凝血活性為指標,建立纖維蛋白原-凝血酶時間法測定活性,以活性濃度與可溶性蛋白濃度的比值(比活)作為活性評價指標。結果10批地龍提取物可溶性蛋白含量為(26.56±3.57)%,比活為(34.64±3.98)U·μg^-1。其比活大小與蚓激酶標準品(43.60 U·μg^-1)相當,且是市售蚯蚓酶(22.17 U·μg^-1)比活的1.5倍。結論采用BCA蛋白測定法測定地龍提取物可溶性蛋白,方法簡便、可靠;所建立的纖維蛋白原-凝血酶時間法,操作簡便,人為影響因素小,結果客觀準確,可用于實時測定,重復性和儀器精密度良好,線性范圍較廣,具有可行性,可用于地龍及其制劑活性的評價。