賴氨酸特異性的去甲基化酶3A對內皮祖細胞功能的影響

摘要：目的探討賴氨酸特異性的去甲基化酶3A(KDM3A)對內皮祖細胞(EPCs)增殖、遷移、管形成能力及分泌促血管生成細胞因子功能的影響。方法從同基因型成年雄性SD大鼠的后肢長骨中分離出骨髓單核細胞,EGM-2培養基誘導形成EPCs,將EPCs按完全隨機設計的方法分為3組:空白組、Ad-GFP轉染對照組和Ad-KDM3A轉染處理組。分別用CCK-8、Transwell檢測EPCs的增殖和遷移能力,基質膠檢測EPCs的管形成能力。免疫印記法檢測KDM3A蛋白的表達及EPCs分泌血管內皮生長因子(VEGF)和基質細胞衍生因子1(SDF-1)蛋白表達量,同時檢測調控分泌機制相關的絲/蘇氨酸蛋白激酶(Akt)、p-Akt蛋白的表達。結果與Ad-GFP轉染對照組比較,Ad-KDM3A轉染處理組下調KDM3A的表達可顯著增強EPCs的增殖能力(1.393±0.058比1.031±0.059)、遷移能力(1.89±0.12比1.21±0.11)和管形成功能(1.552±0.109比1.027±0.038),同時EPCs合成和分泌的促血管生成細胞因子VEGF(0.738±0.029比0.153±0.003)和SDF-1(0.333±0.013比0.163±0.005)增多。與Ad-GFP轉染對照組比較,Ad-KDM3A轉染處理組下調KDM3A可使Akt蛋白表達增加(0.553±0.005比0.169±0.001)。結論下調KDM3A蛋白的表達可增強EPCs的增殖、遷移、管形成能力及分泌促血管生成細胞因子的功能,這可能與增加Akt蛋白表達有關。