以子房為材料制備煙草染色體標本的方法

摘要：為使煙草染色體標本制備過程中取材更方便,本研究以異源五倍體煙草(2n=5x=58)為材料,觀察了不同大小子房、不同預處理方法對煙草染色體制片效果的影響。首先,子房大小按花冠與花萼長度比例分為6類;其次,預處理方法分為2類,即:(1)室溫下于0.002mol/L的8-羥基喹啉中預處理2、4和6h;(2)7℃下于0.002mol/L的8-羥基喹啉中預處理12、24和36h。結果顯示,當花冠長度小于或等于花萼長度的1/2時,子房中分裂期細胞的比例最大,為97.00±17.82個/1000個。該時期子房于7℃經24h預處理后,染色體數目與形態清晰可辨。利用上述方法制作云煙87(2n=4x=48)和N.plumbaginifolia(2n=2x=20)的染色體標本,均獲得較好的結果。此外,將上述方法制作的五倍體煙草染色體經5SrDNA-FISH,獲得了清晰可辨的5個不同信號,與預期一致。可見,幼嫩子房可用于煙草染色體標本的制作,且用改良的預處理方法制備的染色體標本可用于染色體計數和核型分析,也可用于原位雜交分析。