廣金錢草多糖指紋圖譜的建立、含量測定及其對α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究

摘要：目的:建立廣金錢草多糖的指紋圖譜,分析其單糖組成及含量,并考察廣金錢草多糖對α-葡萄糖苷酶的體外抑制作用。方法:采用水提醇沉法提取廣金錢草多糖,經(jīng)三氟乙酸水解、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化后,采用高效液相色譜法(HPLC)建立指紋圖譜(以葡萄糖峰為參照),并進(jìn)行單糖組成及含量分析。含量測定色譜柱為Phenomenex Luna C18,流動相為乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至6.8),梯度洗脫,流速為0.8 mL/min,檢測波長為250 nm,柱溫為30℃,進(jìn)樣量為10μL。以阿卡波糖為對照,采用對硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷法考察廣金錢草多糖對α-葡萄糖苷酶的體外抑制活性。結(jié)果:18批藥材樣品的HPLC指紋圖譜有9個共有峰,其中15批藥材樣品的相似度大于0.90;共指認(rèn)甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等7個共有峰。其中,鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖的含量分別為0.471~2.092、1.379~8.919、2.560~35.679、1.194~6.905、0.566~4.158 mg/g;以鼠李糖為基準(zhǔn),其余4種單糖的摩爾比分別為1.58~4.07、2.26~19.95、2.20~4.21、1.31~2.86。廣金錢草多糖對α-葡萄糖苷酶的抑制活性呈現(xiàn)隨劑量升高而增強(qiáng)的趨勢,其半數(shù)抑制濃度為0.70 mg/mL,低于陽性對照阿卡波糖(7.76 mg/mL)。結(jié)論:不同批次廣金錢草的多糖組成均以葡萄糖為主,各單糖含量有所差異。廣金錢草多糖對α-葡萄糖苷酶具有明顯的體外抑制作用,且活性強(qiáng)于阿卡波糖。