抗Aβ 和AL 雙抗原的單克隆抗體親和力與活性檢測方法的建立

摘要：隨著靶向β-淀粉樣蛋白(β-amyloid,Aβ)和淀粉樣蛋白輕鏈(amyloid light chain,AL)單克隆抗體的開發,建立一種有效的抗Aβ和AL單克隆抗體親和力及其生物活性檢測方法十分必要。Crenezumab是基于Aβ靶點研制的IgG4型全人源化抗Aβ單克隆抗體,對Aβ寡聚體具有較強的親和力。前期計算機方法模擬抗體抗原分子結合試驗證實,可能設計1種新型的抗體對2種抗原均有結合力和生物活性。本文基于研發同時具備抗Aβ和AL 2種抗原新型抗體的需求出發,以Crenezumab為例,建立間接ELISA方法,并用該方法分別檢測Crenezumab抗體對Aβ寡聚體和AL纖維的親和力。進一步建立SH-SY5Y細胞活性實驗方法和ThT熒光分析方法,分別檢測Crenezumab對Aβ和AL抗原的生物活性。本研究建立的檢測方法可為同時靶向Aβ和AL的抗體的藥學初步研究提供檢測方法。