骨髓活檢組織EBER原位雜交檢測影響因素分析

摘要：目的探討骨髓活檢組織行EBV encoded RNA(EBER)原位雜交檢測的影響因素,優化檢測條件以期提高骨髓活檢組織中EB 病毒的檢出率。方法收集35 例EB 病毒相關疾病的骨髓活檢標本,通過對比實驗,比較不同脫鈣方法、不同蛋白酶K 消化條件、不同抗體孵育溫度下的骨髓活檢組織行EBER 原位雜交檢測的切片質量、脫片率及染色質量情況。結果脫鈣以運用改良EDTA 脫鈣液脫鈣20~24h 后流水沖洗30min~1h 最佳;蛋白酶K 消化時間為9min 的組織切片脫片率低,雜交效果最好,陽性細胞著色深,定位準確;在37℃條件下進行抗體孵育雜交染色質量為佳。結論選取合適的脫鈣方式,延長蛋白酶K 消化時間,選擇最佳抗體孵育溫度,可降低脫片率,顯著提高骨髓活檢組織行EBER 原位雜交檢測的染色質量,為EBV 相關疾病的診斷和鑒別診斷提供重要依據。