柴胡皂甙-d對HepG2細胞惡性表型的逆轉作用

摘要：目的探討柴胡皂甙-d（SSd）對人肝癌細胞株HepG2細胞惡性表型的逆轉作用及其機制。方法常規培養HepG2細胞至對數生長期，四甲基偶氮唑鹽（MTT）比色法觀察SSd不同濃度、作用不同時間對HepG2細胞增殖情況的影響。實驗組選擇10mg／L的SSd作用HepG2細胞48h，Giemsa染色法觀察細胞形態學改變；化學發光法測定細胞上清液中甲胎蛋白（AFP）濃度；放射免疫法檢測細胞上清液中白蛋白濃度；transwell小室實驗觀察細胞遷移率；RT—PCR檢測p27基因mRNA表達。并與空白對照組做比較。數據在多組間比較采用隨機分組單因素方差分析，在兩組間比較采用t檢驗。結果10mg／L的SSd作用48h，對HqoG2細胞的生長抑制最明顯（F=266．06，P〈0．01）。實驗組HepG2細胞形態傾向于正常分化，形態變小、變圓，核變小、變圓或卵圓形，核／質比例縮小。與對照組比較，實驗組穿膜細胞數明顯減少[（50．60±4．04）個與（41．00±4．64）個，t=-7．32，P〈0．01）；細胞上清液中自蛋白含量明顯增多[（24．7±2．8）×10-3g／L與（31．1±4．9）×10-3g／L，t=7．83，P〈0．051；AFP含量明顯減少[（118．2±15．6）×10^3μg／L與（70．3士5．7）×10^3μg／L，t=-10．72，P〈0．01]。實驗組p27基因mRNA的相對表達量明顯多于對照組（t=22．00，P〈0．05）。結論SSd對人肝癌細胞株HepG2細胞惡性表型具有明顯的逆轉作用，其機制可能與SSd上調HepG2細胞p27基因mRNA表達使其進入分化過程有關。