CSFV、PRRSV和PCV2多重PCR檢測方法的建立及初步應用

摘要：為建立同時檢測豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬圓環病毒2型的多重PCR,參照GenBank中發表的3種病毒的基因序列,針對豬瘟病毒的E2、豬繁殖與呼吸綜合征病毒的ORF7和豬圓環病毒2型的ORF2等基因,分別設計出3對特異引物,通過優化反應條件,建立了同時檢測3種病毒的多重PCR,該PCR可同時擴增出204 bp(豬瘟病毒)、314 bp(豬繁殖與呼吸綜合征病毒)和485 bp(豬圓環病毒2型)的目的條帶,豬偽狂犬病病毒、豬細小病毒和豬流行性腹瀉病毒的擴增結果為陰性。選取96份疑似有繁殖障礙病的母豬,采集病豬血清樣品進行檢測,其中感染2種以上病毒的樣品比例為34.3%(33/96)。結果表明,多重PCR與單一PCR的符合率為100%,該方法可用于豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬圓環病毒2型等病毒的臨床快速檢測與流行病學調查。