人CD8＋CD28一抑制性T淋巴細(xì)胞的體外擴(kuò)增及其抗原特異性調(diào)節(jié)作用

摘要：目的探討在體外大量擴(kuò)增CD8＋CD28一抑制性T淋巴細(xì)胞（Ts細(xì)胞）的方法，并檢驗(yàn)其免疫調(diào)節(jié)作用。方法分離健康志愿者全血中CD8＋T淋巴細(xì)胞，在含不同細(xì)胞因子和異體抗原提呈細(xì)胞（APC）的培養(yǎng)條件下進(jìn)行體外擴(kuò)增。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)擴(kuò)增過(guò)程中CD28一細(xì)胞亞群的比例進(jìn)行監(jiān)測(cè)。分為3組進(jìn)行混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，反應(yīng)細(xì)胞均為CD4’T淋巴細(xì)胞：B-Am組以來(lái)源于原致敏供者的APC作為刺激細(xì)胞，I-APC組以HLA-A、B、DR全錯(cuò)配的無(wú)關(guān)供者的APC作為刺激細(xì)胞，Dynabeads組以包被有抗CD3和CD28單克隆抗體的免疫微球Dynabeads作為刺激細(xì)胞；擴(kuò)增后的Ts細(xì)胞作為第三方調(diào)節(jié)細(xì)胞加入混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)中，測(cè)定其對(duì)CIN’T淋巴細(xì)胞增殖的抑制作用。結(jié)果在含白細(xì)胞介素2（IL-2）＋I(xiàn)L-7＋I(xiàn)L-15的培養(yǎng)條件下，CD8＋T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)后CD8＋CD28T淋巴細(xì)胞亞群的比例最高（P〈0．05）。BAPc組不加入Ts細(xì)胞時(shí)，增殖的CD4＋T淋巴細(xì)胞比例為66．7％，當(dāng)加入的Ts細(xì)胞與反應(yīng)細(xì)胞的比例分別為0．5：1、0．1：1和0．02：1時(shí)，增殖的CD4＋T淋巴細(xì)胞比例分別為16．5％、34．1％和62．6％。Ts細(xì)胞對(duì)CIN’T淋巴細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用，而在I—Apc組和Dynabeads組中，此抑制作用不明顯。結(jié)論應(yīng)用含IL-2＋I(xiàn)L_7＋I(xiàn)L_15的培養(yǎng)條件聯(lián)合異體APC刺激可以在體外大量擴(kuò)增Ts細(xì)胞，擴(kuò)增所得Ts細(xì)胞在體外對(duì)供者CD4＋T淋巴細(xì)胞的增殖有明顯抗原特異性抑制作用。