聚己內酯/明膠納米纖維膜在組織工程化視網膜色素上皮構建中的應用

摘要：目的探索聚己內酯/明膠納米纖維復合膜在構建組織工程化視網膜色素上皮(RPE)中的應用前景。方法采用自發分化法將人胚胎干細胞(ESC)誘導為視網膜色素上皮(ESC-RPE)細胞,并通過流式細胞術檢測ESC-RPE細胞特定細胞標志物的表達情況;采用靜電紡絲法制備聚己內酯(PCL)納米纖維膜和PCL/明膠納米纖維復合膜,掃描電子顯微鏡下觀察2種納米纖維膜的表面形貌,并測定2種支架的接觸角;利用細胞計數試劑盒-8(CCK-8)法檢測2種納米纖維膜浸提液對ESC-RPE細胞活力的影響;將ESC-RPE細胞培養在PCL/明膠納米纖維復合膜上,通過免疫熒光法檢測組織工程化RPE特異性標志物的表達。結果ESC-RPE細胞不表達多能性標志物OCT4,陽性表達RPE特異性標志物小眼畸形相關轉錄因子(MITF)、RPE65和Bestrophin。PCL納米纖維膜和PCL/明膠納米纖維復合膜均呈纖維多孔狀,2種支架的接觸角分別為(97.2±3.1)°和(13.6±2.4)°,2種支架的浸提液對ESC-RPE細胞的生長均無顯著影響。培養在PCL/明膠納米纖維復合膜上的ESC-RPE細胞陽性表達特異性標志物MITF和ZO-1。結論PCL/明膠納米纖維復合膜具有良好的親水性和生物相容性,并且可支持ESC-RPE細胞的生長,有望應用于組織工程化RPE的構建。