MEK通路抑制劑對人胰腺癌細胞生長及細胞周期相關抑癌基因表達的影響

摘要：目的觀察細胞外信號調節激酶信號通路（MEK）抑制劑對人胰腺癌細胞生長及細胞周期相關的抑癌基因表達的影響。方法培養人胰腺癌細胞系CFPACl、PANCl和MiaPaCa2，應用50p,mol／L的MEK抑制劑PD98059處理細胞24h，四甲基偶氮唑藍（mTr）法檢測細胞增殖，流式細胞儀分析細胞周期，實時定量PCR法檢測p16^INK4a、p21WAF1和p27^KIP1 mRNA的表達，蛋白質印跡法檢測DNA甲基化酶（Dnmt）1、3a和3b表達，甲基化特異性PCR（MSP）分析p16^INK4a基因啟動子甲基化狀況。結果PD98059處理24h后，CFPACI、PANCl和MiaPaCa2細胞的增殖抑制率分別為69％、78％和45％；Co／Gl期細胞比例分別從（68．214-0．73）％、（56．54±0．68）％、（54．894±0．79）％增加到（80．37±0．65）％、（72．05±0．52）％、（79．21±0．93）％（P值均〈0．05）；S期和G2／M期細胞比例相應減少。PD98059處理后，CFPACl、PANCl細胞p27^KIP1、p21^WAF1和p16^INK4a mRNA表達增加，Dnmtl和Dnmt3b蛋白表達減少；p16^INK4a‰啟動子甲基化狀態被去除。而MiaPaCa2細胞僅p27^KIP1 mRNA表達增加；p21^WAF1、p16^INK4a mRNA和Dnmt表達均無明顯變化。結論MEK通路抑制劑可能通過下調DNA甲基化酶、上調細胞周期相關抑癌基因表達而抑制胰腺癌細胞周期進展和細胞增殖。