青藤堿對脂多糖誘導的人成纖維滑膜細胞增殖的影響

摘要：目的:探討青藤堿(Sinomenine)對脂多糖誘導的人成纖維樣滑膜細胞(Human fibroblast-like synoviocyte,HFLS)增殖的作用及其機制。方法:隨機分為空白對照組、脂多糖模型組、青藤堿10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L組。利用脂多糖誘導HFLS的增殖,48 h后加入不同濃度的青藤堿,通過MTT法檢測細胞增殖,流式細胞儀檢測細胞凋亡,Western Blot檢測凋亡相關蛋白B淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相關X蛋白(Bax)、P53、細胞周期依賴激酶4(CDK4)、細胞周期蛋白D(CyclinD)的表達,檢測核轉錄因子-κB(NF-κB)、核因子κB受體活化因子(RANK)、核因子κB受體活化因子配體(RANK-L)蛋白表達;ELISA法檢測白介素10(IL-10)、白介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)與白介素1β(IL-1β)的含量。結果:MTT結果顯示與空白對照組比較,模型組細胞增殖明顯;與模型組比較,不同濃度的青藤堿均能抑制脂多糖誘導HFLS增殖,結果呈濃度依賴性;流式結果表明青藤堿可促進HFLS的凋亡;Western Blot結果提示與模型組相比,青藤堿組Bax、P53的蛋白表達明顯升高,Cyclin D、CDK4、NF-κB、RANK、RANK-L蛋白的表達顯著降低。結論:青藤堿可以通過抑制RANK及NF-κB的活化減輕脂多糖誘導的HFLS細胞的炎癥反應,促進HFLS凋亡,抑制其增殖。